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　　该酌量通过冷冻电镜单颗粒工夫初次解析了启动子连合的呼吸道合胞病毒RNA集结酶的高区别率构造，正在人类史籍上初次□揭示 了呼吸道合胞■病毒 集结酶的=RNA合成肇端机制。明晰R NA的合成肇端 ○进■程中RSV集结酶■与其RNA启动子之 间的彼…此影响，看待明白RSV中RNA的合成机制以及开采针对R SV的抗 ○病毒 药物和诊治伎俩至闭紧要。

　　呼吸道合胞病毒（Respirat△ory Syncytial Virus推进▽钙摄取，简称RSV）□是一种高度沾染性的人类病原体。婴小儿、晚年人、免疫编制受损的个人★以及 心肺 疾病患者★◁都△是… △R SV濡…★染○的高 危人群。RSV属于肺病毒科（Pneumoviridae）单负链病毒目（Mon onegaviral es），其基因组□为单链★负义RNA。RSV的RNA转录和复制由RSV的R○NA依赖性RNA集结酶□（RNA-d△ependent RNA Polymerase，简称RdR P） 转录和复制。RdRP由众功效集结酶卵白（○L arg△ e，简称L）和◁辅因子磷卵○白（Phosph oprotein，简称P）构成。RSV集 结酶中L卵白由五个■▽构 造域 构成：RNA依▽赖性RNA 集结酶构★ 造域（R▽dRp）、加帽构造域（Cap）、连结构造域（CD）、甲基改观酶 构▽○造 ◁域（◁ △MT）和C 终○局构造域（CT★D）。而RSV集结酶中P卵★白能够分为N端构造域（P★NTD）、寡聚化构造域（POD）和 C端构造域 （PCTD）（睹 图1a）。

　　RSV中R NA的合因素为肇 端、延长和终止三个阶段。正在RSV的RNA合成肇端■进程中，RSV集结酶识○别病 毒R=N○A基因组和反基 因组3端的启动子序列，即Leader（Le）和Trai○ler Complementary（TrC）。之前的酌量证明，RSV★集结=酶一个特有的特点是○能够正在启★动子的两△个差□异 的○处■所启动RN■A合成：RNA的复制从启动子的第… 1位核苷酸先导合成；RNA的转录从Le启… 动子的 第3位核苷酸先导合成。体外酶活实行证明，RSV集结酶正在短Le和TrC模板上能够分裂正 在 第1位和第■3位核苷酸肇端RN○ A合成。因为缺乏RNA启动子连合□的RSV集结酶的原子区…别率构造，两个差异肇 端处所的构造根源仍不明晰。

　　作家通过体外酶活实=行采取了10个核苷酸 长度的Le和TrC启动子序列（简称Le10和TrC10），解析了RSV集结酶（L-P复合物）分裂与来自病毒RNA□基因组和反基因组3端启动子Le10和TrC10的高区别率冷 冻电镜构造。RNA启 动子 连合的集结酶构造中，卵白 构造与…apo -□form的RSV集结 酶构造相等近似，此中RdRp和Ca p◁构造域酿成一个碗状 ▽构△造，而RNA□ 合成的活性口袋位于碗状构造的中心处所（睹图1b）。Cap构造域中的p riming △loop仍是远离RdRp构造域中的活性位 点，示意该构造为pr○e-i… nit iation的状况。差异的是，RSV集结酶L卵白RdRp 构造域中的supporting helix正在没有RNA连合 时▽是柔 性的并不行…被3D重构，suppo○rting helix 能够 被 明晰的 重构，证明RNA▽启动○子的连合会导致▽RSV集结 酶的构造的构象转变，使support=ing h e◁lix的构造更…稳固。

　　图1：RSV集结酶的构造示妄念和两种pre-ini ti a tion状况 ★构造的比 力。

　　构造说明显示启动子Le10与RSV集结酶■的复合物中推进钙…摄取，正在集结酶的活性口袋中有4个◁核苷酸残基，第5-10位核苷酸残基位于模板进入通道（template entrance chann=el）中，催化位点氨基酸D811正对着第3位和第4位…核苷酸残基，示意该○构造为○启动子第3位核苷酸肇 端RNA合成的pr e-initiation状况；而正在启 动子TrC10与R SV集结酶的复合□物中推 进钙摄取，正在○集 结 酶的活性口袋中唯 有2个▽核苷酸残。凯发k8国际促进钙吸收。